多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 （UIP）法

長期以來，許多的研究者希望IHC方法更敏感、更穩(wěn)定、更簡單，要求多步檢測系統(tǒng)簡化，但敏感性要進(jìn)一步提高，使這一技術(shù)面臨巨大的挑戰(zhàn)。在實踐中，往往是步驟減少了，敏感性也降低，這是一對矛盾。為了克服這一矛盾，為此嘗試了許多辦法，如催化信號放大系統(tǒng)（CSA）、免疫PCR、末端產(chǎn)物放大技術(shù)等方法，其敏感性增加了，但伴隨而來的高非特異性背景染色使應(yīng)用者難接受。

一種新的多聚螯合物酶二步法在1995年被隆重推出，該方法與簡單的二步法相比較，具有很高的敏感性、穩(wěn)定性和特異性。目前，多聚螯合物酶法也稱非生物素檢測系統(tǒng)，有三種不同物質(zhì)設(shè)計的多聚螯合物，它們是以碳為骨架（C—C—C—C—C—C—C一）的多聚螯合，主要構(gòu)成EnVision法的EnVision試劑。它的主要缺點(diǎn)是不易折疊，相對分子質(zhì)量大，形成空間障礙，使穿透細(xì)胞或核膜能力下降，影響到方法的敏感性，并常出現(xiàn)組織染色不均一。另一種是以多聚糖為骨架的多聚螯合物，主要用于PowerVision法，它可以折疊，使酶和抗體分子呈串珠樣緊密排列，其復(fù)合物顆粒小于EnVision試劑，其敏感性好于En—Vision法。第三種是以氨基酸類為骨架的多聚螯合物，主要用于UIP（universal immu—noperoxidasepolymer）法，其敏感性基本與PowerVision法相同。其缺點(diǎn)是多聚物中有N末端暴露，形成的電荷能和組織細(xì)胞發(fā)生靜電吸附，可造成非特異性染色，染色時需平衡靜電荷。

UIP（universalimmuno—enzymepolymer）法，即通用免疫酶復(fù)合物法，是Nkhirei發(fā)明的一種新型免疫組化染色方法。其基本原理及工作流程與EnVision法相似，不同的是UIP復(fù)合物為HRP—氨基酸—抗鼠或抗兔IgG復(fù)合物（N—Histofine復(fù)合物）。因N—Histofine復(fù)合物相對分子質(zhì)量較EnVision復(fù)合物相對分子質(zhì)量稍小，理論上具有更強(qiáng)的穿透力。
多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 （UIP）法