羞羞色院91蜜桃-日本不卡在线-www.狠狠-久久五月婷-日本极品少妇-在线观看中文-欧美色图一区二区三区-男人av网-精品动漫一区-饥渴的熟妇张开腿呻吟视频-看中国毛片-久久久极品-亚洲精品国产精品乱码视色-少妇色欲网-在线国产区-成年人看的黄色片-日本精品视频网站-538任你躁在线精品免费-欧美18aaaⅹxx-日本色一区-亚洲不卡中文字幕无码-色综合天天色综合-野花社区视频在线观看-国产精品骚-大地资源二中文在线影视免费观看

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 公司動態NEWS

    您當前的位置:首頁 > 公司動態 > ELISA試劑盒的定性和定量

    ELISA試劑盒的定性和定量

    發布時間: 2015-03-27  點擊次數: 1195次

        ELISA檢測試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術為您解析: 
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。ELISA檢測試劑盒試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。
    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,ELISA檢測試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 国产三级午夜理伦三级 | 在线| 特级av| 99热精品在线观看 | 天天干天天摸 | 强伦人妻一区二区三区 | www.国产在线 | 嫩草一区二区三区 | 桃色视频 | 亚洲天堂男人 | 久久久老熟女一区二区三区91 | 国产熟妇与子伦hd | 国产视频一区二区 | aaa国产 | 中文字幕av一区二区 | 成人精品三级av在线看 | 中国av在线 | 一区二区三区视频在线观看 | av免费在线播放 | 中文字幕一区二区久久人妻 | 久久只有精品 | 男人天堂影院 | 国产精品丝袜 | 91免费看片 | 亚洲精品一区二区三区在线观看 | 午夜影院在线 | 免费观看毛片 | 色欲av无码一区二区三区 | 国产伦精品一区二区三区88av | www.jizzjizz| 欧美精品久久久久 | 国产毛片在线 | 日韩有码在线观看 | 日本xxxxxⅹxxxx69| 中文字幕一区二区三区四区 | 四虎影成人精品a片 | 一区二区三区高清 | 天天射天天 | 日日干夜夜干 | 91精品一区| 午夜毛片 | 潘金莲一级淫片aaaaaa播放 | 国产欧美日韩 | 国产a√| 国产在线不卡 | 影音先锋制服丝袜 | 午夜精品久久久久久久99黑人 | 亚洲精品一二三区 | 国精产品一区二区 | 午夜国产视频 | 久久久久亚洲精品 | 在线视频一区二区三区 | 国产一区二区免费视频 | 日本在线一区 | av资源网站 | 在线免费观看毛片 | 亚洲看片 | 久久新| 500部大龄熟乱视频 亚洲一级片 | 冲田杏梨在线 | 嫩草国产 | 西西人体大胆4444ww张筱雨 | 国产调教 | 午夜精品视频在线观看 | 黄色在线观看视频 | 国产电影一区二区三区 | 国产精品黄色 | 久久久精品久久久 | 亚洲视频在线观看 | 狠狠影院 | 久久精彩视频 | 午夜毛片 | www.尤物 | 亚洲色欲色欲www在线观看 | 国产精品久久久午夜夜伦鲁鲁 | 天天插天天射 | 人妻精品一区二区三区 | 欧美视频免费 | 亚洲精品午夜精品 | 在线| 男女爱爱动态图 | 亚洲乱码一区二区 | 五月激情综合 | 欧美日韩国产一区二区三区 | 日韩黄色片 | 爽交换快高h中文字幕 | 天天干天天做 | 精品少妇人妻一区二区黑料社区 | 国产无遮挡又黄又爽免费网站 | 在线观看av网站 | 成人超碰 | 色午夜 | 在线视频在线观看 | 成人91| 在线视频一区二区 | 成人香蕉视频 | 国产一区二区不卡 | av片网站| 成人动漫av |