血清是zui常用的ELISA試劑盒標本之一，ELISA檢測中血漿一般可視為與血清平等的標本，標本中煩擾性物質是引起檢測后作用偏高或偏低的主要原因，煩擾性物質分為內源性物質和外源性物質兩大類；
外源性物質常常是由于用于ELISA測定的血標本的搜集、貯存等不當所構成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集 不全和采血管中添加物等影響。
由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的 ELISA測定中，會導致非特異性顯色，煩擾測定作用。
標本受細菌污染 ：因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可發生非特異性顯色而煩擾測定作用。
ELISA試劑盒標本保存不當 ：在冰箱中保存過久的標本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構成二聚體，在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至構成檢測OD值偏高；
標本凝集不全；在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的要素許多，在考慮試劑要素和操作要素之外，也應從標本要素方面進行分析。
常見的煩擾物質有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應物質和其它物質等。
類風濕因子 ：血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）在ELISA檢測中，可與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合，然后導致檢測OD值偏高。
補體 ： ELISA系統中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發生變構，其FC段的補體C1q分子結合位點被露出出來，使C1q 可以將二者連接起來，然后構成檢測OD值偏高。
嗜異性抗體；人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig (s) 結合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統中一抗和二抗連接起來，也能構成檢測OD值偏高。
ELISA試劑盒此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應物質及血清中脂質過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定作用有煩擾作用。